Defesa de dissertação da mestranda Maria Helena Souza de Aguiar
O Programa de Pós-Graduação em Medicina Veterinária Convencional e Integrativa (PPGMVCI) convida toda a comunidade acadêmica para prestigiar a sessão de defesa de dissertação da mestranda Maria Helena Souza de Aguiar.
Título: EFEITOS DA INDUÇÃO DE ESTRESSE DE RETÍCULO ENDOPLASMÁTICO SOBRE O DESENVOLVIMENTO in vitro DE EMBRIÕES BOVINOS
Resumo: As biotecnologias aplicadas à reprodução animal encontram-se em plena expansão comercial, o Brasil possui o maior rebanho comercial bovino do mundo, e utiliza em larga escala a Produção in vitro de Embriões (PIV). Esta biotecnologia apresenta desafios a serem superados buscando elevar sua eficiência, minimizando fatores que tornam o ambiente in vitro subótimo. O objetivo deste trabalho foi determinar as consequências do estresse de Retículo Endoplasmático (RE) em diferentes fases do desenvolvimento embrionário in vitro na espécie bovina. Realizando inicialmente um experimento dose-resposta (25, 50 e 100 µM) de um 
agente inibidor de estresse de RE, ácido taurousrodesoxicólico/TUDCA (TD). Em um segundo experimento dose-resposta (0,1, 1 e 10ng/ml) foi avaliado o efeito de um indutor de estresse de RE, Tunicamicina (TN) durante todo o período de cultivo embrionário in vitro (CIV). Posteriormente, com a finalidade de determinar em que momento do desenvolvimento embrionário o estresse de RE é mais deletério, os embriões receberam o tratamento na dose de 1 ng/ml de TN em diferentes momentos do CIV, sendo estes correspondentes ao período anterior (D 1-3), durante (D 3-5) e pós (D 5-7) Ativação do Genoma Embrionário (EGA). Em um quarto experimento, com a finalidade de comprovar que a indução de estresse gerada pela TN tem ação no RE, realizou-se a associação de TN+TD em diferentes momentos do CIV, seja durante todo o período do desenvolvimento embrionário (TN+TD 1-7), e durante a ativação do genoma embrionário (TN + TD 3-5), comparados a grupos tratados somente com TN de maneira isolada nos mesmos períodos. Os principais resultados obtidos demonstram que o uso de TD na dose de 100µM foi capaz de melhorar a qualidade dos embriões produzidos comparados ao grupo controle. Ao contrário, nos embriões tratados com TN observou-se um efeito dose-resposta na piora do desenvolvimento e qualidade dos embriões produzidos. Além disso o efeito negativo da TN foi mais evidente durante e após a EGA. A associação da TD foi capaz de atenuar os efeitos deletérios da TN sobre o desenvolvimento. Foram ainda avaliados genes relacionados ao RE (GRP78, ATF6, PERK, IRE1, XBP1-s, XBP1-u) e fatores de pluripotência (OCT4, SOX2, NANOG) em embriões tratados com TN de maneira isolada ou em associação com a TD em diferentes momentos do CIV, não foram observadas diferenças signficativas nos níveis de expresão dos genes avaliados no estádio de Blastocisto. Em conjunto os dados obtidos permitem afirmar que o estresse de RE é um importante aspecto relacionado à viabilidade embrionária, além disso a atenuação proporcionada pela adição de TD de maneira isolada tem efeito benéfico sobre a qualidade dos embriões produzidos.